RUDN Journal of Agronomy and Animal IndustriesRUDN Journal of Agronomy and Animal IndustriesВестник Российского университета дружбы народов. Серия: Агрономия и животноводство2312-797X2312-7988Peoples’ Friendship University of Russia named after Patrice Lumumba1719ArticlesСтатьиControlling the reliability of results received during laboratory testing for phytosanitary purposes when molecular diagnostic methods are usedКонтроль достоверности результатов фитосанитарной экспертизы при использовании молекулярных методов диагностикиMazurinE SМазуринЕвгений СергеевичКафедра генетики, растениеводства и защиты растенийФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»ул. Пограничная, 32, пос. Быково, Раменский р-н,Московская обл,. Россия, 140150; Российский университет дружбы народов; Peoples' Friendship University of RussiaКафедра генетики, растениеводства и защиты растенийФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»ул. Пограничная, 32, пос. Быково, Раменский р-н,Московская обл,. Россия, 140150; Российский университет дружбы народовzarauh@mail.ruKopinaM BКопинаМария БорисовнаAll-Russian Plant Quarantine CenterФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»marija508a@mail.ruSherokolavaN AШероколаваНаталья АлександровнаAll-Russian Plant Quarantine CenterФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»natalia_sh@mail.ruPeoples' Friendship University of RussiaРоссийский университет дружбы народовAll-Russian Plant Quarantine CenterФГБУ «Всероссийский центр карантина растений»150320123NO3 (2012)№3 (2012)313805092016Copyright ©; 2012, Мазурин Е.С., Копина М.Б., Шероколава Н.А.2012Мазурин Е.С., Копина М.Б., Шероколава Н.А.http://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://agrojournal.rudn.ru/agronomy/article/view/1719An internal PCR control system based on a mouse gene fragment cloned into a vector was developed. The created internal control system allowed for choosing a method for DNA extraction from bio-baits which doesn't inhibit the amplification process when Phytophthora sp. is being diagnosed. During the process of diagnosing the pathogen of the ring rot of potato, it was shown that the developed internal control in real-time PCR turned out to be more informative than the mitochondrial gene of a host plant used for that purpose.Разработана система внутреннего контроля (ВК) прохождения ПЦР на основе фрагмента гена мыши, встроенного в вектор. Созданная система ВК позволила выбрать метод выделения ДНК из биоприманок, не ингибирующий процесс амплификации при диагностике Phytophthora sp. При диагностике возбудителя кольцевой гнили картофеля было показано, что разработанный ВК в режиме ПЦР «в реальном времени» оказался более информативным, чем при использовании в качестве ВК митохондриального гена растения-хозяина.PCRinternal controldiagnosticsquarantine organismsПЦРвнутренний контрольдиагностикакарантинные организмы1.Головин С.Е. Методические указания по диагностике и учету болезней корней и стеблей земляники и малины, передающихся через почву. - M.: ВСТИСП, 2001.2.Джалилов Ф.С., Мазурин Е.С., Игнатов А.Н. Усовершенствование методики диагностики зараженности семян капусты возбудителем сосудистого бактериоза. - Сборник трудов международной научно-практической конференции «Агротехнологии XXI века». - М.: РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева, 2007. - С. 73-753.Мазурин Е.С. Методы диагностики возбудителя сосудистого бактериоза капусты и меры защиты: Автореф. дисc. ... канд. биол. наук. - М., 2009.4.Рязанцев Д.Ю., Абрамов Д.Д., Дробязина П.Е. и др. Диагностика ряда фитопатогенов методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией результатов при помощи диагностических наборов производства ООО «АгроДиагностика». Методические указания. - М., 2009.5.Diagnostic protocols for regulated pest. Plum Pox potyvirus // Bulletin OEPP/EPPO. - 2004. - Vol. 34. - P. 247-256.6.Diagnostic protocol for Pantoea stewartii subsp. stewartii // Bulletin OEPP/EPPO. - 2006. - Vol. 36. - P. 111-115.7.Diagnostic protocol for Meloidogyne chitwoodi and Meloidogyne falla // Bulletin OEPP/ EPPO. - 2009. - PM 7/41 (2). - Vol. 39. - P. 5-17.8.Doyle J.J., Doyle J.L. Isolation of plant DNA from fresh tissue // Focus. Life technolog. inc. - 1990. - V. 12. - P. 13-15.9.Klerks M.M., Zijlstra C., van Bruggen A.H.C. Comparison of real-time PCR methods for detection of Salmonella entenca and Escherichia coli 0157:H7 and quantification using a general internal amplification control // Journal of Microbiological Methods. - 2004. - Vol. 59. - P. 337-349.10.Pastrik K.H., Elphinstone J.G., Pukall R. Sequence analysis and detection of Ralstonia solanacearum by multiplex PCR amplification of 16S-23S ribosomal intergenic spacer region with internal positive control // European Journal of Plant Pathology. - 2002. - Vol. 108. - P. 831-842.11.Schaad W., Berthier-Schaad Y., Sechler A., Knorr D. Detection of Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus in potato tubers by BIO-PCR and an automated real-time fluorescence detection system // Plant Disease. - 1999. - Vol. 83. - P. 1095-1100.12.Schena L., Duncan J.M., Cooke D.E.L. Development and application of a PCR-based "molecular tool box" for the identification of Phytophthora species damaging forests and natural ecosystems // Plant Pathol. - 2007. - Vol. 57. - P. 64.13.Weller S.A., Elphinstone J.G., Smith N.C., Boonham N., Stead D.E. Detection of Ralstonia solanacearum strains with a quantitative, multiplex, real-time, fluorogenic PCR (TaqMan) assay // Appl. Environ. Microbiol. - 2000. - Vol. 66. - P. 2853-2858.