Анализ патогенетической манифестации декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек

Полный текст

Введение

Клинический опыт показывает, что при воздействии комплекса неблагоприятных факторов внешней среды, неполноценного питания, нарушений ветеринарно-­санитарных норм содержания, несоблюдении профилактических карт вакцинации инфекционных болезней и эмпирической антибиотикотерапии может снижаться иммунореактивность организма, и, как следствие, может возникать ряд иммунодефицитных состояний [1–4]. В результате приведенного комплекса причин, а также на фоне снижения количества индигенной микробиоты в различных биотопах организма активизируется рост и развитие условно патогенной микрофлоры, могут появиться штаммы с патогенными свой­ствами [2, 5–9]. Изменение экологического баланса в микробиоценозе может изменить законы форматирования микроэкологических систем, что приводит к возможности роста и развития нестандартных сочетаний микроорганизмов в биотопах организма, которые приведут к возникновению новых сложнокомпонентных и, зачастую, недоброкачественных микробиоценозов [7, 10–13]. Особенности течения дисбактериоза кишечника у животных, стертые границы клинической картины, неоднородность симптомов, широкий спектр этиологических факторов создают значительные трудности при диагностике, при этом зачастую ветеринарными специалистами упускается из виду развитие этого синдрома [3, 6, 14]. В этой связи коррекция дисбиозов кишечника у животных, в т. ч. и у кошек, остается одной из наиболее сложных и актуальных проблем практической ветеринарной деятельности.

В последние десятилетия у мелких домашних животных регистрируется неуклонный рост патологий, сопровождающихся нарушениями работы желудочно-­кишечного тракта различной этиологии [9, 15]. Однако несмотря на создание новых поколений антибактериальных препаратов, пробиотиков, фитобиотиков, пребиотиков, вследствие просчетов при своевременной постановке диагноза, частота возникновения дисбактериозов при различных патологических процессах не только не снижается, а, наоборот, постоянно растет [2, 16, 17]. Поэтому оптимизация и совершенствование диагностических подходов, а также предложение новых эффективных схем коррекции дисбактериоза кишечника наиболее тяжелой декомпенсированной степени у кошек, на наш взгляд, является актуальным направлением научных изысканий в ветеринарной гастроэнтерологии.

Цель исследования — изучение сравнительной эффективности различных схем фармакотерапии декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек.

Материалы и методы исследования

Исследования проведены на базе департамента ветеринарной медицины Российского университета дружбы народов на протяжении 2018–2022 гг. Клиническая часть работы выполнена на базе частных клиник ветеринарной медицины: «Аветтура», «Эпиона» и «В мире с животными».

Диагноз при подозрении на дисбактериоз кишечника ставили комплексно, с учетом данных анамнеза, клинического осмотра, а также микробиологических исследований. Оценку степени тяжести дисбактериоза кишечника (компенсированная, субкомпенсированная, декомпенсированная) осуществляли на основании проведенных клинико-­лабораторных исследований. Контролем служили клинически здоровые особи (n = 6) в возрасте от 2 до 6 лет, смешанного пола, которых обследовали с письменного согласия их владельцев перед плановой вакцинацией.

Микробиологические исследования проводили общепринятыми методами. Образцы крови в ЭДТА анализировали на автоматизированном гематологическом анализаторе Mythic 18 с ветеринарным программным обеспечением (C2 DIAGNOSTICS S.A., France). Рассчитывали функциональный показатель гемопоэза и клеточных элементов — нагрузочный эритроцитарный коэффициент (НЭК), который определяли по формуле

НЭК = СОЭ·10 ÷ Hb,

где СОЭ — показатель скорости оседания эритроцитов; 10 — радикальный элемент, проявляющий анализируемую функцию; Hb — показатель гемоглобина.

Кошки с декомпенсированным дисбактериозом кишечника, поступившие в ветеринарные клиники «методом конвертов», были рандомно разделены на три опытные группы: С1 (n = 5); С2 (n = 5) и С3 (n = 5). Дизайн исследования приведен на рисунке.

Животным всех опытных групп проводили по показаниям патогенетическую терапию и назначали пробиотик «Лактобифадол» (содержит в одном грамме препарата не менее 1,0 × 106 КОЕ живых клеток молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ЛГ1-ДЕП-ВГИКИ и 8,0 × 107 КОЕ живых клеток бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis В-1-ДЕП-ВГНКИ) в дозе 0,2…0,4 г/кг массы животного один раз в сутки в течение 14 дней. Животным второй опытной группы, кроме этого, применяли перорально пребиотик «Ветелакт» содержит лактулозу — не менее 50 %) из расчета 0,1 мл на 1 кг массы животного ежедневно в течение 14 дней. Кошкам третьей опытной группы помимо пребиотика «Ветелакт» назначали иммуномодулятор «Азоксивет» (содержит в 1 мл препарата Азоксимера бромид — 1,5 мг), который вводили п/к или в/в 1 раз в сутки на протяжении 7 дней, в дозе 0.3 мг/кг живой массы. У животных С1 — С3 опытных групп по показаниям инфузионная терапия заключалась во внутривенном капельном введении раствора натрия хлорида 0,9 % в дозе 10 мл/кг; 5 % раствора глюкозы в дозе 10 мл/кг; реосорбелакта в дозе 5 мл/кг и рефортана в дозе 2,5 мл/кг живой массы.

Схема коррекции

Статистический анализ и интерпретацию полученных данных проводили с помощью компьютерной программы STATISTICA 7.0 (StatSoft, USA). При этом определяли среднюю арифметическую (Mean) и среднеквадратическую ошибку (SE), а также рассчитывали стандартное отклонение (SD). После статистического анализа определяли достоверность разницы между показателями опытных групп до и после фармакокоррекции, которую рассчитывали по методу Манна — Уитни.

Результаты исследований и обсуждение

Подход к коррекции дисбиоза кишечника должен быть комплексным, учитывающим причины его возникновения, восстанавливающим полученную брешь в микробном биотопе, создать благоприятные условия для размножения и заселения индигенной микрофлоры, а также стимулировать иммунологический ответ больного животного. В этой связи при коррекции микробиоты кишечника у кошек мы исследовали эффективность пробиотика, сочетанного влияния пробиотика и пребиотика, а также комплексного действия пробиотика, пребиотика и иммуномодулятора. Эффективность терапии декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек определяли по изменениям клинической картины в динамике коррекции, результаты которой отражены в табл. 1.

Все три терапевтические схемы, которые применяли кошкам с декомпенсированным дисбактериозом кишечника, показали свою эффективность, что наглядно подтверждает общее клиническое улучшение у животных С1—С3 опытных групп на 10,00 ± 0,31, 9,20 ± 0,20 и 7,80 ± 0,20 сутки соответственно. Необходимо отметить, что наиболее эффективной схемой коррекции наиболее тяжелой третьей степени дисбактериоза кишечника у кошек является схема, которую назначали животным группы С1. Так, у животных третьей опытной группы нормализация аппетита, галитоза, фактуры фекалий и общее клиническое улучшение наступали в 1,18 раза (р < 0,05); 1,27 раза (р < 0,01); 1,34 раза (р < 0,01) и 1,28 раза (р < 0,001) соответственно быстрее при сравнении с показателями группы С1.

Таблица 1
Эффективность терапии декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек

Клиническая манифестация	Опытные группы
	С1	С2	С3
Стабилизация аппетита, сут.	8,80 ± 0,37	8,20 ± 0,37	7,40 ± 0,24*
Нормализация галитоза, сут.	7,40 ± 0,24	6,60 ± 0,24	5,80 ± 0,20**
Нормализация фекалий, сут.	7,00 ± 0,31	6,20 ± 0,20	5,20 ± 0,20**
Общее клиническое улучшение, сут.	10,00 ± 0,31	9,20 ± 0,20	7,80 ± 0,20***

Примечание. *р < 0,05; **р < 0,01; ***р < 0,001.

Организм животного и населяющая его микрофлора, в т. ч. и микробиота кишечника, являются сбалансированной экологической системой. Поэтому любые качественные или количественные изменения микробного биоценоза будут, несомненно, оказывать существенное влияние на всю систему гомеостаза в целом. В этой связи для раскрытия причин возникновения расстройств работы кишечного тракта решающее значение имеют, прежде всего, результаты бактериологического исследования [3, 4]. Нами для наиболее объективного контроля эффективности коррекции дисбиоза кишечника у кошек проведены микробиологические исследования проб фекалий животных до терапии, а также на 7-е и 14-е сутки в динамике их лечения.

Результаты микробиологических исследований в процессе терапии кошек с декомпенсированным дисбактериозом кишечника С1—С3 опытных групп приведены в табл. 2–4.

Таблица 2
Сопоставление микробиоты кишечника от кошек группы С₁ с декомпенсированным дисбактериозом, lg

Род микроорганизма	До коррекции	В динамике коррекции
		7-е сутки	14-е сутки
Lactobacillus sp. p.	4,47 ± 0,49	7,37 ± 0,25***	9,11 ± 0,20***
Bifidobacterium sp. p.	4,05 ± 0,54	6,96 ± 0,50**	9,26 ± 0,24***
Staphylococcus sp. p.	7,71 ± 0,53	5,66 ± 0,38*	3,57 ± 0,25***
Streptococcus sp. p.	7,31 ± 0,74	5,15 ± 0,63	3,60 ± 0,49**
Escherichia sp. p.	8,39 ± 0,50	7,83 ± 0,32	7,54 ± 0,27
Pseudomonas sp. p.	4,30 ± 1,05	1,72 ± 0,55	0,89 ± 0,42*
Klebsiella sp. p.	7,63 ± 0,81	4,44 ± 0,55*	2,29 ± 0,39***
Citrobacter sp. p.	6,93 ± 0,60	4,51 ± 0,37**	3,15 ± 0,17***
Enterobacter sp. p.	7,21 ± 0,59	4,69 ± 0,45**	3,27 ± 0,39***
Bacillus sp. p.	6,35 ± 0,46	4,65 ± 0,31*	2,68 ± 0,32***
Proteus sp. p.	4,96 ± 0,97	2,50 ± 0,64	1,09 ± 0,48**
Candida sp. p.	6,28 ± 0,26	2,99 ± 0,30***	1,20 ± 0,36***

Примечание. *р < 0,05; **р < 0,01; ***р < 0,001.

Таблица 3
Сопоставление микробиоты кишечника от кошек группы С₂ с декомпенсированным дисбактериозом, lg

Род микроорганизма	До коррекции	В динамике коррекции
		7 сутки	14 сутки
Lactobacillus sp. p.	2,81 ± 1,15	7,75 ± 0,44**	9,19 ± 0,25***
Bifidobacterium sp. p.	1,70 ± 0,73	7,93 ± 0,37***	9,85 ± 0,32***
Staphylococcus sp. p.	5,85 ± 1,54	3,97 ± 1,06	2,36 ± 0,84
Streptococcus sp. p.	6,03 ± 1,54	4,18 ± 1,06	2,41 ± 0,63
Escherichia sp. p.	8,03 ± 0,43	7,71 ± 0,31	7,55 ± 0,21
Pseudomonas sp. p.	2,65 ± 1,65	0	0
Klebsiella sp. p.	4,97 ± 2,03	2,24 ± 0,95	0*
Citrobacter sp. p.	5,79 ± 1,54	3,23 ± 0,98	2,02 ± 0,63
Enterobacter sp. p.	4,00 ± 1,66	2,75 ± 1,16	3,12 ± 0,45
Bacillus sp. p.	4,20 ± 1,75	2,56 ± 1,06	2,39 ± 0,99
Proteus sp. p.	3,74 ± 1,55	1,19 ± 0,52	0*
Candida sp. p.	3,90 ± 1,67	1,94 ± 0,81	0,92 ± 0,41

Примечание. *р < 0,05; **р < 0,01; ***р < 0,001.

Таблица 4
Сопоставление микробиоты кишечника от кошек группы С₃ с декомпенсированным дисбактериозом, lg

Род микроорганизма	До коррекции	В динамике коррекции
		7 сутки	14 сутки
Lactobacillus sp. p.	1,84±1,17	8,19±0,46**	8,67±0,35***
Bifidobacterium sp. p.	0,47±0,47	9,15±0,39***	9,91±0,39***
Staphylococcus sp. p.	1,36±1,36	2,03±0,89	1,90±0,80
Streptococcus sp. p.	7,68±0,52	4,17±0,23***	3,27±0,33***
Escherichia sp. p.	8,19±0,50	6,95±0,49	6,84±0,23*
Pseudomonas sp. p.	6,58±0,30	0***	0***
Klebsiella sp. p.	6,22±0,55	2,20±0,40***	0***
Citrobacter sp. p.	3,26±2,00	1,53±0,71	1,42±0,65
Enterobacter sp. p.	2,98±1,85	1,79±0,89	1,57±0,76
Bacillus sp. p.	1,73±1,73	1,53±0,68	1,48±0,60
Proteus sp. p.	0	0	0
Candida sp. p.	3,57±2,19	0	0

Примечание. *р < 0,05; **р < 0,01; ***р < 0,001.

Результаты сопоставления (табл. 1–4) указывают на то, что при терапии домашних кошек с третьей степенью декомпенсации дисбактериоза кишечника С1—С3 опытных групп в пробах фекальных масс, отобранных для бактериологических исследований, уже на седьмые сутки коррекционного периода регистрировали достоверное увеличение количества представителей рода Lactobacillus sp. p. в 1,64 (р < 0,001), 2,75 (р < 0,01) и 4,45 раза (р < 0,01) соответственно при сравнении с выходными показателями. На 14-е сутки терапии у животных С1, С2 и С3 опытных групп в пробах фекалий наблюдали высокодостоверное (р < 0,001) увеличение количества лактобактерий в 2,03; 3,27 и 4,71 раза соответственно при сравнении с исходными данными. Аналогичную позитивную динамику наблюдали при анализе количества бифидобактерий в пробах фекалий кошек с декомпенсированным дисбактериозом кишечника, в процессе их терапии. Так, на 14-е сутки фармакотерапии в пробах фекалий наблюдали высокодостоверное (р < 0,001) увеличение представителей Bifidobacterium sp. p. у кошек С1, С2 и С3 опытных групп в 2,28 раза, с 4,05 ± 0,54 до 9,26 ± 0,24 lg; в 5,79 раза, с 1,70 ± 0,73 до 9,85 ± 0,32 lg и в 21,08 раза, с 0,47 ± 0,47 до 9,91 ± 0,39 lg соответственно. Кроме этого, уже на 7-е сутки терапии у животных группы С3 наблюдали достоверное уменьшение количества стрептококков в 1,84 раза (р < 0,001), клебсиелл в 2,82 раза (р  < 0,001), полное отсутствие изоляции псевдомонад и грибов рода Кандида. Позитивную динамику наблюдали у животных этой группы и на 14-е сутки терапии, что сопровождалось отсутствием изоляции клебсиелл.

При постановке диагноза помимо детального анализа микробиоценоза кишечника необходимо также учитывать и патогенетические особенности течения дисбиоза, что позволит наиболее точно поставить диагноз, определить степень тяжести патологии, спрогнозировать дальнейшее ее течение, а также подобрать оптимальную тактику терапевтической коррекции [16]. Динамика изменения гематологических аналитов кошек при декомпенсированном дисбактериозе кишечника, в процессе их терапии, нашла свой отпечаток в табл. 5–7.

Таблица 5
Динамика гематологических аналитов кошек группы С₁ с декомпенсированным дисбактериозом на фоне терапии

Показатели	До коррекции	В динамике коррекции
		7 сутки	14 сутки
Гемоглобин, г/л	101,80 ± 5,04	115,20 ± 3,89	128,80 ± 1,90**
СОЭ, мм/ч	26,40 ± 2,52	13,60 ± 1,02**	6,00 ± 0,44***
НЭК, усл. ед.	2,61 ± 0,27	1,17 ± 0,07**	0,46 ± 0,02***
Лейкоциты, Г/л	16,42 ± 1,02	10,94 ± 0,57**	9,16 ± 0,30***

Примечание. *р < 0,05; **р < 0,01; ***р < 0,001.

Таблица 6
Динамика гематологических аналитов кошек группы С₂ с декомпенсированным дисбактериозом на фоне терапии

Показатели	До коррекции	В динамике коррекции
		7-е сутки	14-е сутки
Гемоглобин, г/л	100,40 ± 3,95	123,00 ± 4,32**	136,40 ± 2,94***
СОЭ, мм/ч	22,60 ± 4,00	10,20 ± 0,86*	4,80 ± 0,66**
НЭК, усл. ед.	2,27 ± 0,40	0,82 ± 0,06**	0,34 ± 0,04**
Лейкоциты, Г/л	20,30 ± 1,23	11,38 ± 0,50***	8,48 ± 0,29***

Примечание. *р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001.

Таблица 7
Динамика гематологических аналитов кошек группы С₃ с декомпенсированным дисбактериозом на фоне терапии

Показатели	До коррекции	В динамике коррекции
		7-е сутки	14-е сутки
Гемоглобин, г/л	102,20 ± 4,59	137,20 ± 2,63***	145,20 ± 2,35***
СОЭ, мм/ч	23,80 ± 2,59	6,00 ± 0,70***	3,80 ± 0,37***
НЭК, усл. ед.	2,34 ± 0,27	0,43 ± 0,04***	0,25 ± 0,02***
Лейкоциты, Г/л	17,64 ± 0,53	9,82 ± 0,44***	8,40 ± 0,29***

Примечание. *р < 0,05; ** р < 0,01; *** р < 0,001.

Установлено, что наиболее позитивные сдвиги гематологических показателей регистрировали у кошек С3 опытной группы. Так, у домашних кошек третьей опытной группы уже на седьмые сутки коррекции регистрировали высокодостоверное увеличение количества гемоглобина в 1,34 раза (р < 0,001), на фоне достоверного уменьшения показателя СОЭ в 3,96 раза (р < 0,001), показателя НЭК в 5,44 раза (р < 0,001) и уровня лейкоцитов в 1,79 раза (р < 0,001), при сравнении гематологическими показателями до назначения терапии. Дальнейшее наблюдение за опытными животными подтверждает эффективность коррекции животных С3 группы. Так, на 14-е сутки комплексной фармакокоррекции домашних кошек пробиотиком, пребиотиком и иммуномодулятором привело к дальнейшему увеличению уровня гемоглобина в 1,42 раза (р < 0,001), уменьшению показателя СОЭ в 6,26 раза (р < 0,001), с 23,80 ± 2,59 до 3,80 ± 0,37 мм/ч; показателя НЭК в 9,36 раза (р < 0,001), с 2,34 ± 0,27 до 0,25 ± 0,02 усл. ед. и уровня лейкоцитов в 2,10 раза (р < 0,001), с 17,64 ± 0,53 до 8,40 ± 0,29 Г/л, при сравнении с показателями опытных кошек до назначения лечения.

В результате исследования нами раскрыты механизмы формирования микробиоценоза кишечника при наиболее тяжелой декомпенсированной степени у домашних кошек, усовершенствованы диагностические подходы путем детального клинического анализа и коррекции дисбиозов. Установлено, что при постановке диагноза определение тяжести течения дисбиоза кишечника у кошек имеет определенное прогностическое значение, которое в итоге может влиять на наиболее оптимальный выбор терапевтической коррекции. Введение к терапевтическим схемам коррекции декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек пробиотика «Лактобифадол», пребиотика «Ветелакт» и иммуномодулятора «Азоксивет» оказалось патогенетически обоснованным.

Заключение

Научно обоснованы клинико-­диагностические подходы, а также усовершенствованы методы коррекции декомпенсированного дисбактериоза кишечника у кошек. Так, при декомпенсированном дисбактериозе кишечника у кошек назначение «Лактобифадола» (0,2…0,4 г/кг массы) в комплексе с «Ветелактом» (0,1 мл на 1 кг массы), «Азоксиветом» (0,3 мг/кг массы) и инфузионной терапии (натрия хлорида 0,9 % раствор, в/в, капельно, в дозе 10 мл/кг; 5 % раствор глюкозы, в/в, капельно, в дозе 10 мл/кг; раствор реосорбелакта, в/в, капельно, в дозе 5 мл/кг; раствор рефортана, в/в, капельно, в дозе 2,5 мл/кг живой массы тела) на протяжении 7 дней является наиболее эффективным. Об этом свидетельствует регистрация общего клинического улучшения в 1,28 раза быстрее, а также нормализация аппетита, галитоза, фактуры фекалий у кошек третьей опытной группы на 1,40; 1,60 и 1,80 суток раньше, в сравнении с больными кошками первой опытной группы.

Об авторах

Евгений Владимирович Куликов

Российский университет дружбы народов

Email: eugeny1978@list.ru
ORCID iD: 0000-0001-6936-2163

кандидат биологических наук, доцент, департамент ветеринарной медицины, аграрно-технологический институт

Российская Федерация, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Николай Валерьевич Бабичев

Российский университет дружбы народов

Email: babichev-nv@rudn.ru
ORCID iD: 0000-0001-8444-8600

кандидат биологических наук, доцент, департамент ветеринарной медицины, аграрно-технологический институт

Российская Федерация, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Алена Игоревна Тележенкова

Российский университет дружбы народов

Email: telezhenkova-ai@rudn.ru

ассистент, департамент ветеринарной медицины, аграрно-технологический институт

Российская Федерация, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Николай Сергеевич Бугров

Российский университет дружбы народов

Email: bugr24-8@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4116-0620

аспирант, департамент ветеринарной медицины, аграрно-технологический институт

Российская Федерация, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Павел Анатольевич Руденко

Российский университет дружбы народов; Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: pavelrudenko76@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0418-9918

доктор ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник, лаборатория биохимии клеточной поверхности микроорганизмов, ФИЦ ПНЦБИ «Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина» Российской академии наук (ИБФМ РАН); доцент департамента ветеринарной медицины аграрно-технологического института, Российский университет дружбы народов

Российская Федерация, 142290, Московская область, г. Пущино, пр. Науки, д. 5; Российская Федерация, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Список литературы

Дополнительные файлы