Оценка гематологических параметров у кошек с лимфомой кишечника

Полный текст

Введение

Значение лабораторной диагностики при опухолевых заболеваниях у животных приобретает особую актуальность ввиду сложного и инвазивного вмешательства при выполнении биопсии [1, 2]. В плане ранней диагностики заболеваний внутренних органов важное значение имеет изучение биохимических и общеклинических показателей крови. В связи с этим, большой интерес представляет оценка совокупности клеточного состава крови, эритроцитарных индексов, ферментов, продуктов обмена жира, белка, углеводов, а также электролитов [3].

В российской и зарубежной литературе практически отсутствуют обобщенные сведения о гематологической картине при опухолевом росте, в т. ч. в кишечнике у кошек. Не описаны изменения в крови у кошек с лимфомой кишечника на разных этапах роста [4, 5]. Имеются фрагментарные сведения, касающиеся изменений в крови у животных при опухоли молочной железы, первичных и вторичных опухолях грудной полости, паранеопластическом синдроме [6, 7]. Из медицинской литературы известно, что при В-клеточной и Ходжкинской лимфомах наблюдают преимущественно изменение клеточного состава крови, при этом, авторы указывают, что эти изменения являются плохим прогностическим фактором [8, 9].

В связи с вышеизложенным, цель исследования — оценка гематологических параметров у кошек с лимфомой кишечника на основании выявленных ультразвуковых изменений, характеризующих объем опухолевой массы.

Материалы и методы исследования

Работа выполнена на кафедре ветеринарной хирургии Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии — МВА имени К.И. Скрябина и на базе ветеринарного центра «Доктор Хаг» в период с 2021 по 2023 гг. Объектами исследований являлись 20 кошек с клиническими признаками расстройства функций пищеварительной системы. Кошки были различных пород, вес находился в диапазоне от 2700 до 3100 г, возраст животных — от 1 года до 19 лет. Такая возрастная вариация была следствием обращения за ветеринарной помощью на разных стадиях поражения опухолью кишечника и лимфоузлов, соответственно, наблюдалась корреляция между возрастом животного и объемом опухолевого роста и на основании этого были сформированы группы: 1 группа (1–5 лет) — характеризовалась утолщением стенки тонкой кишки от 2,1 до 2,7 мм и утолщением подслизистого или мышечного слоев; 2‑я группа (6–10 лет) — утолщением стенки тонкой кишки от 2,8 до 3,5 мм, утолщением подслизистого и/или мышечного слоев, нарушением перистальтики; 3‑я группа (11–15 лет) — утолщением стенки тонкой кишки от 3,6 до 4,5 мм, утолщением подслизистого и/или мышечного слоев, частичной потерей дифференциацией слоев, неоднородной эхоструктурой и повышенной эхогенностью стенок, неоднородностью лимфатических узлов; 4‑я группа (16–19 лет) — утолщением стенки тонкой кишки более 4,5 мм, деформацией просвета кишки, увеличением лимфатических узлов, наличием свободной жидкости.

Все животные были кастрированы в раннем возрасте, условия кормления и содержания были сходными. При этом, были исключены хронические вирусные инфекции.

Всем животным было проведено клиническое обследование по общепринятой методике, ультразвуковое исследование брюшной полости на аппаратах Mindray DC‑60, Mindray DC‑90 Vet и LOGIQ F6, линейными и микроконвексными датчиками (7…12 МГц), гематологические, цитологические и гистологические исследования пораженной ткани кишечника. Также были выполнены экспресс-­тесты на вирусные инфекции для верификации диагноза, использовались такие методы как ПЦР (полимеразная цепная реакция) и ИХА (иммунохроматографический анализ). Окончательный диагноз кошкам ставили с помощью цитологического исследования измененного участка кишечника и лимфоузлов. Материал был получен в ходе тонкоигольной биопсии, проведенной под контролем УЗИ. Образцы помещали на стерильное стекло, фиксировали, окрашивали по Романовскому — Гимзе, микроскопировали при увеличении 900×.

Проведена оценка средних параметры выборок. Для анализа нами получены малые выборки, следовательно, чтобы подтвердить статистическую достоверность различия средних характеристик выборок использовался непараметрический критерий Краскела — Уоллиса, с помощью которого мы проверили гипотезу о том, что значения нескольких совокупностей, из которых извлечены сравниваемые независимые выборки, отличаются друг от друга. Расчеты проведены в программе SPSS Statistics 27.

Результаты исследований и обсуждение

Показатели общего клинического исследования крови у кошек при лимфоме приведены в табл. 1: на 4‑й стадии средний показатель лейкоцитов составил 19,4 ± 5,2 × 10⁹/л. Такой уровень повышения лейкоцитов, по данным литературы, характеризуется как умеренный и не указывает на патологический процесс в конкретной ткани или органе.

Таблица 1
Показатели общего клинического исследования крови у кошек с лимфомой кишечника на разных стадиях

Показатель	Референсные значения	1‑я стадия	2‑я стадия	3‑я стадия	4‑я стадия
Лейкоциты, количество × 109/л	5,5…19,5	9,7 ± 1,4	12,5 ± 2,4	12,45 ± 2,37	19,4 ± 5,2
Гемоглобин, г/л	85,0…182,0	138,0 ± 4,2	112,0 ± 27,0	119,0 ± 8,5	118,2 ± 7,7
Гематокрит, г/л	26,0…61,0	39,9 ± 1,6	32,3 ± 9,4	34,5 ± 2,2	35,7 ± 2,4
Эритроциты, количество ×1012/л	4,60…12,18	10,18 ± 0,61	7,1 ± 1,2	8,6 ± 0,6	8,4 ± 0,78
Средний объем эритроцита (MCV)	38,0…54,0	39,6 ± 2,3	44,5 ± 5,8	39,9 ± 1,01	41,1 ± 2,8
Среднее содержание гемоглобина (MCH)	11,8…19,7	13,7 ± 0,8	15,6 ± 1,2	13,9 ± 0,48	14,5 ± 0,51
Средняя концентрация гемоглобина (MCHC)	33,0…360,0	346,8 ± 6,3	352,5 ± 18,5	345,6 ± 5,84	337,5 ± 5,2
Нейтрофилы,%	3,12…12,58	17,9 ± 12,3	9,6 ± 2,6	7,97 ± 2,89	9,16 ± 1,55
Лимфоциты,%	0,73…7,86	2,9 ± 0,4	2,17 ± 0,39	1,9 ± 0,3	2,26 ± 0,54
Моноциты,%	0,07…1,36	0,31 ± 0,06	0,42 ± 0,17	0,27 ± 0,12	0,54 ± 0,17
Эозинофилы,%	0,06…1,93	0,55 ± 0,12	0,26 ± 0,04	0,92 ± 0,49	0,6 ± 0,22
Базофилы,%	0,00…0,12	0	0	0,02 ± 0,001	0,01 ± 0,01
Тромбоциты, тыc. (PLT)	100,0…730,0	271,2 ± 28,5	393,5 ± 149,5	317,3 ± 135,01	335,2 ± 36,24

Примечание. p = 0,05.
Источник: выполнили  А.В. Гончарова, Т.К. Атабаева, В.А. Костылев.

Table 1
Indicators of general clinical blood test in cats with intestinal lymphoma at different stages

Indicator	Reference values	Stage 1	Stage 2	Stage 3	Stage 4
Leukocytes, 109/L	5.5…19.5	9.7 ± 1.4	12.5 ± 2.4	12.45 ± 2.37	19.4 ± 5.2
Hemoglobin, g/L	85.0…182.0	138.0 ± 4.2	112.0 ± 27.0	119.0 ± 8.5	118.2 ± 7.7
Hematocrit, g/L	26.0…61.0	39.9 ± 1.6	32.3 ± 9.4	34.5 ± 2.2	35.7 ± 2.4
Erythrocytes, 1012/L	4.60…12.18	10.18 ± 0.61	7.1 ± 1.2	8.6 ± 0.6	8.4 ± 0.78
Mean corpuscular volume (MCV)	38.0…54.0	39.6 ± 2.3	44.5 ± 5.8	39.9 ± 1.01	41.1 ± 2.8
Mean corpuscular hemoglobin (MCH)	11.8…19.7	13.7 ± 0.8	15.6 ± 1.2	13.9 ± 0.48	14.5 ± 0.51
Mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC)	33.0…360.0	346.8 ± 6.3	352.5 ± 18.5	345.6 ± 5.84	337.5 ± 5.2
Neutrophils,%	3.12…12.58	17.9 ± 12.3	9.6 ± 2.6	7.97 ± 2.89	9.16 ± 1.55
Lymphocytes,%	0.73…7.86	2.9 ± 0.4	2.17 ± 0.39	1.9 ± 0.3	2.26 ± 0.54
Monocytes,%	0.07…1.36	0.31 ± 0.06	0.42 ± 0.17	0.27 ± 0.12	0.54 ± 0.17
Eosinophils,%	0.06…1.93	0.55 ± 0.12	0.26 ± 0.04	0.92 ± 0.49	0.6 ± 0.22
Basophils,%	0.00…0.12	0	0	0.02 ± 0.001	0.01 ± 0.01
Thrombocytes, thousand (PLT)	100.0…730.0	271.2 ± 28.5	393.5 ± 149.5	317.3 ± 135.01	335.2 ± 36.24

Note. p = 0.05.
Source: completed by A.V. Goncharova, T.K. Atabaeva, V.A. Kostylev.

Показатели биохимического исследования крови у кошек при лимфоме (табл. 2): на 2‑й стадии средний показатель мочевины составил 16,0 ± 5,6 ммоль/л; на 3‑й стадии средний показатель АЛТ — 115,6 ± 69,7 ЕД/л; АСТ — 97,0 ± 68,0 ЕД/л; на 4‑й стадии средний показатель АСТ — 134,6 ± 82,6 ЕД/л; мочевина — 20,28 ± 6,08 ммоль/л; креатинин — 239,8 ± 78,3 ммоль/л.

Таблица 2
Показатели биохимического исследования сыворотки крови у кошек с лимфомой кишечника на разных стадиях

Показатель	Референсные значения	1‑я стадия	2‑я стадия	3‑я стадия	4‑я стадия
АЛТ, ЕД/л	22,0…84,0	61,0 ± 5,0	67,5 ± 18,5	115,6 ± 69,7	60,3 ± 12,7
АСТ, ЕД/л	18,0…51,0	25,8 ± 1,9	31,0 ± 5,0	97,0 ± 68,0	134,6 ± 82,6
Общий белок, г/л	57,0…78,0	71,8 ± 1,6	69,5 ± 9,5	63,3 ± 2,6	62,15 ± 2,71
Общий билирубин, мкмоль/л	2,0…7,0	3,0 ± 0,04	2,0 ± 1,0	5,0 ± 1,0	5,65 ± 1,55
Альбумин, г/л	23,0…35,0	35,8 ± 0,9	34,5 ± 2,5	27,0 ± 1,0	53,15 ± 27,81
ГГТ, ЕД /л	1,0…10,0	2,8 ± 1,8	4,0 ± 1,0	2,5 ± 1,5	4,2 ± 1,1
Мочевина, ммоль/л	6,28…11,71	10,4 ± 0,4	16,0 ± 5,6	7,5 ± 0,39	20,28 ± 6,08
Креатинин, мкмоль/л	71,0…159,0	130,2 ± 5,6	97,5 ± 14,5	104,6 ± 8,2	239,8 ± 78,3
Щелочная фосфатаза, ЕД /л	9,0…53,0	45,4 ± 3,1	47,5 ± 3,5	36,0 ± 4,5	35,3 ± 5,9
Фосфор, ммоль/л	0,84…1,94	1,34 ± 0,07	1,4 ± 0,2	1,62 ± 0,04	1,62 ± 0,26
Натрий, ммоль/л	143,0…165,0	150,8 ± 1,9	147,0 ± 5,0	153,0 ± 3,0	150,09 ± 1,69
Калий, ммоль/л	4,1…5,4	3,88 ± 0,15	3,9 ± 0,2	5,05 ± 0,85	3,8 ± 0,2
Хлор, ммоль/л	107,0…122,0	115,8 ± 1,6	116,0 ± 6,0	116,5 ± 0,5	117,17 ± 1,42
Глюкоза, ммоль/л	3,9…8,2	4,79 ± 0,36	7,45 ± 0,95	6,03 ± 0,13	6,4 ± 0,4

Примечание. p = 0,05.
Источник: выполнили  А.В. Гончарова, Т.К. Атабаева, В.А. Костылев.

Table 2
Serum biochemistry parameters in cats with intestinal lymphoma at different stages

Indicator	Reference values	Stage 1	Stage 2	Stage 3	Stage 4
ALT, U/L	22.0…84.0	61.0 ± 5.0	67.5 ± 18.5	115.6 ± 69.7	60.3 ± 12.7
AST, U/L	18.0…51.0	25.8 ± 1.9	31.0 ± 5.0	97.0 ± 68.0	134.6 ± 82.6
Total protein, g/L	57.0…78.0	71.8 ± 1.6	69.5 ± 9.5	63.3 ± 2.6	62.15 ± 2.71
Total bilirubin, μmol/L	2.0…7.0	3.0 ± 0.04	2.0 ± 1.0	5.0 ± 1.0	5.65 ± 1.55
Albumin, g/L	23.0…35.0	35.8 ± 0.9	34.5 ± 2.5	27.0 ± 1.0	53.15 ± 27.81
GGT, U/L	1.0…10.0	2.8 ± 1.8	4.0 ± 1.0	2.5 ± 1.5	4.2 ± 1.1
Urea, mmol/L	6.28…11.71	10.4 ± 0.4	16.0 ± 5.6	7.5 ± 0.39	20.28 ± 6.08
Creatinine, μmol/L	71.0…159.0	130.2 ± 5.6	97.5 ± 14.5	104.6 ± 8.2	239.8 ± 78.3
Alkaline phosphatase, U/L	9.0…53.0	45.4 ± 3.1	47.5 ± 3.5	36.0 ± 4.5	35.3 ± 5.9
Phosphorus, mmol/L	0.84…1.94	1.34 ± 0.07	1.4 ± 0.2	1.62 ± 0.04	1.62 ± 0.26
Sodium, mmol/L	143.0…165.0	150.8 ± 1.9	147.0 ± 5.0	153.0 ± 3.0	150.09 ± 1.69
Potassium, mmol/L	4.1…5.4	3.88 ± 0.15	3.9 ± 0.2	5.05 ± 0.85	3.8 ± 0.2
Chloride, mmol/L	107.0…122.0	115.8 ± 1.6	116.0 ± 6.0	116.5 ± 0.5	117.17 ± 1.42
Glucose, mmol/L	3.9…8.2	4.79 ± 0.36	7.45 ± 0.95	6.03 ± 0.13	6.4 ± 0.4

Note. p = 0.05.
Source: completed by A.V. Goncharova, T.K. Atabaeva, V.A. Kostylev.

Результаты расчетов непараметрического критерия Краскела — Уоллиса и асимптотической значимости для четырех независимых малых выборок приведены в табл. 3: такие показатели крови у кошек с лимфомой кишечника, как альбумин, мочевина, глюкоза и базофилы, статистически достоверно отличаются от уровня этих показателей здоровых животных. Для остальных показателей разница между выборками статистически не значима, различия возникли случайно.

Таблица 3
Расчеты непараметрического критерия Краскела — Уоллиса и асимптотической значимости для четырех независимых малых выборок

Показатели крови	H Крускала — Уоллеса	Асимп. знач. (двухсторонняя)
Базофилы,%	8,809	0,032
Альбумин, г/л	8,848	0,031
Мочевина, ммоль/л	7,891	0,048
Глюкоза, ммоль/л	9,842	0,020

Источник: выполнили  А.В. Гончарова, Т.К. Атабаева, В.А. Костылев.

Table 3
Calculations of nonparametric Kruskal — Wallis test  and asymptotic significance for four independent small samples

Blood indicators	H Kruskal — Wallis	Asymptotic significance (two-sided)
Basophils,%	8.809	0.032
Albumin, g/L	8.848	0.031
Urea, mmol/L	7.891	0.048
Glucose, mmol/L	9.842	0.020

Source: completed by A.V. Goncharova, T.K. Atabaeva, V.A. Kostylev.

Алиментарная лимфома у кошек представляет собой группу опухолевых заболеваний, при которых в патологический процесс вовлекаются разные отделы кишечника, лимфоузлы и окружающая жировая ткань [9—11]. Большой интерес представляет возможность ранней диагностики опухолевого процесса на основании данных рутинных гематологических исследований, таких как биохимический и клинический анализы. Однако, нет данных, позволяющих выделить специфические изменения при лимфомах разных типах [12, 13]. Так, из научного сообщения Д.А. Вильмис [7] известно, что чаще всего у собак и кошек устанавливают анемию, тромбоцитопению, панцитопению, лейкоцитоз/лейкопению как комплекс признаков паранеопластического синдрома. При этом такие изменения наблюдают на поздних стадиях, когда размер опухоли достигает значительного и присутствуют множественные метастазы.

Н.В. Ленкова, А.В. Вольф [14] описывают эритроцитопению, лейкоцитоз, лимфоцитоз, а также повышение уровня АСТ и мочевины при алиментарной лимфоме у кошек.

По нашим данным, у кошек с лимфомой кишечника наблюдались отклонения в гематологических параметрах при достижении размеров опухоли 3 мм и вовлечении в патологический процесс окружающих тканей. Мы зафиксировали повышение концентрации мочевины, креатинина, АЛТ, АСТ, лейкоцитов. Уровень повышения активности форменных элементов крови — лейкоцитов, а также продуктов обмена белка и трансаминаз можно охарактеризовать как умеренный. Так как упитанность животных в момент осмотра и взятия крови была зафиксирована ниже средней, а структурных изменений внутренних органов, за исключением кишечника и лимфоузлов, не было выявлено, мы связывали изменения этих параметров не с опухолевым процессом, а с возникающей на фоне вовлечения в патологический процесс окружающих тканей, прогрессирующей потерей мышечной массы. Что находит подтверждение в работах И.И. Григорьевой, Т.А. Раскиной [15]. В результате проведенных исследований мы уточнили имеющиеся в литературе данные, а также провели корреляцию между размером опухоли и изменением гематологических параметров [11, 16—18].

Заключение

Доказана статистическая достоверность отличия некоторых показателей крови, таких как альбумин, мочевина, глюкоза и базофилы у кошек с различной стадией заболевания (лимфома кишечника) от аналогичных показателей здоровых животных. Это позволяет предположить определенную зависимость этих показателей от стадии заболевания. На 2, 3 и 4‑й стадиях лимфомы кишечника выявлены достоверные изменения таких показателей крови как альбумин, мочевина, глюкоза и базофилы, что может свидетельствовать о деструктивных поражениях организма в целом при массивном росте опухоли и вовлечении в патологический процесс окружающих тканей.

Об авторах

Анна Витальевна Гончарова

Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина

Email: annatrukhan@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2142-2507
SPIN-код: 9362-5847

доктор ветеринарных наук, доцент, профессор кафедры ветеринарной хирургии

Российская Федерация, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23

Татьяна Константиновна Атабаева

Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина

Автор, ответственный за переписку.
Email: tanya-atabaeva@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0008-5749-7050

аспирант

Российская Федерация, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23

Владислав Алексеевич Костылев

Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина

Email: vetsurgery1@gmail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1405-4213
SPIN-код: 9017-6331

кандидат ветеринарных наук, доцент, доцент кафедры ветеринарной хирургии

Российская Федерация, г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23

Список литературы