Механизм формирования и становления продуктами пчеловодства микробиоты кишечника здоровых и больных кандидамикозами птиц

Полный текст

Введение

Биологически активные продукты пчеловодства (БАПП), обладающие разносторонней биологической активностью, имеющие оптимальный химический состав, привлекают внимание ученых и исследователей. В литературе имеются сведения по изучению влияния на биологические показатели организма и продуктивность птиц прополиса, маточного молочка, перги, подмора пчел [1], но исследования экстракта восковой моли (ЭВМ), трутневого гомогената пчел (ЭТГ) являются единичными и требуют глубокого научного анализа [2, 3].

Экстракты трутневого гомогената и восковой моли служат источником витаминов, в т. ч. А, D, Е и группы В, минералов (K, Na, Ca, Fe, Mg, Zn, Mn, Cu, I, P, Ni, Co, Cr, и др.), белков (более 30 аминокислот, в т. ч. все незаменимые), протеаз, липаз, нуклеотидов, полиненасыщенных жирных кислот класса омега 3, 6, деценовой кислоты, стероидных гормонов, серотонина. Уникальный химический состав, сочетание компонентов, исключающих антагонизм, благодаря переработке ферментами мандибулярных желез пчел, определяют их разностороннюю биологическую активность, свой ства и экологичность, в отличие от традиционных химически синтезированных препаратов [4–10].

С другой стороны, в птицеводстве стали часто регистрировать кандидамикозы пищеварительного тракта (КПТ). Мы провели всесторонние исследования КПТ на гусях и установили, что КПТ приводят к глубоким иммунодефицитам, дисбактериозам, изменениям ферментативной и биохимической активности печени и поджелудочной железы, морфофункциональным перестройкам в центральных и периферических органах иммуногенеза, ультраструктурным перестройкам в гепатоцитах печени [11–12]. КПТ перепелов малоизучены, они возникают внезапно и завершаются летально в 90…100 % случаях.

Разведение перепелов приобретает популярность и высокий спрос, ибо перепелиное мясо и яйца являются диетическими, сбалансированными по жировому и белковому составу. Но на фоне нарушения колонизационной резистентности при развитии КПТ перепелов в толстом отделе кишечника активизируется размножение условно- патогенных Candida albicans. Это связано с усилением у C. albicans факторов вирулентности: изменений в механизмах адгезии, синтеза протеолитических ферментов, ингибирования факторов естественной защиты (АЛФА, АИгА, АЛА, АКА), трансформация в гифальную форму с псевдомицелием, образование биопленок [13–16].

С учетом высокой биологической активности экстрактов восковой моли, трутневого гомогената и прополиса, целью исследования стала оптимизация степени формирования и становления колонизационной резистентности кишечника под влиянием этих продуктов пчеловодства и определение характера его восстановления на фоне КПТ птиц.

Материал и методы исследования

Исследования проводились в лабораториях кафедры пчеловодства и аквакультуры, микробиологии и иммунологии РГАУ — МСХА им. К.А. Тимирязева. Опыты ставили на перепелах мясной японской породы, в количестве 280 гол., которых инкубировали в птичнике университета. Птиц содержали в клеточных батареях БВМ-Ф-4Ц для молодняка. Освещенность, T, °C, влажность в помещении, плотность посадки, тип кормления соответствовали рекомендациям Всероссийского научно- исследовательского и технологического института птицеводства. Птицы 1 группы служили контролем — здоровые (без включения в рацион БАПП). Перепела групп 2, 3 и 4 — здоровые, с включением в рацион БАПП. В рацион птиц группы 2 вводили ЭВМ (расчет: 70 капель на 35 птиц, растворив в 350 мл воды), группы 3 — ЭТГ (расчет: 35 гранул на 35 птиц, растворив в 350 мл воды), группы 4 — экстракт прополиса (ЭП — настойка прополиса на 70° этиловом спирте разводится из расчета 5 мл на 1000,0 мл воды). ЭП готовится из расчета: 3,5 мл разведенной настойки прополиса на 35 птиц, растворив в 350 мл воды.

Выпаивание экстрактов БАПП во группах 2, 3 и 4 проводили ежедневно в течение 30 сут., внося суточную дозу 1 раз в день в поилки с питьевой водой. Перепела групп 5–8 были больны КПТ. В рацион птиц группы 5, как и 1 контрольной, БАПП не вносили. Больным КПТ перепелам птиц группы 6 вносили ЭВМ, группы 7 — ЭТГ, группы 8 — ЭП, удвоив выше представленную суточную дозу и выпаивая 2 раза в день с питьевой водой, утром и днем.

Выделение лактобактерий проводили в микроанаэростате на классической среде МРС с использованием GasPak Anaerobic System. Бифидобактерии выделяли на среде Блаурокка. Для культивирования Candida albicans использовали агар Сабуро с хлорамфениколом 2 (фирма Biomerieux). Для точного определения вида Candida albicans его идентифицировали масс-спектрометрическим методом на MALDI Biotyper (в ФГОУ НМЦ гематологии Минздрава России). Также идентификацию Candida albicans проводили с использованием системы API-System S.A. В последующих рядовых сериях опытах ДПГ культивировали на среде Сабуро со стрептомицином (100 ЕД/л). Чистую культуру клинических штаммов ДПГ выделяли на хромогенной среде Никерсона.

Цифровой материал подвергнут статистической обработке методами вариационной статистики с использованием программ Statistica 6.1 и приложения Excel из пакета MS Office 2007.

Результаты исследования и обсуждение

Результаты исследования изменений в содержимом толстого отдела кишечника здоровых и больных КПТ перепелов условно-п атогенных Candida albicans приведены в табл. 1. Уровень Candida albicans в кишечнике птиц 1 контрольной группы не имел существенных отклонений по периодам опыта. До 30 сут. исследований их значение колебалось в пределах от 3,36 до 3,78 lgКОЕ/г. На 60-е сутки опыта, по сравнению с предыдущим сроком исследований (30-е сут.), содержание кандид в контроле снизилось в 1,33 и 1,6 раза, что показывает стабилизацию их уровня в здоровом организме перепелов в возрастном аспекте. БАПП оказывали, даже в сравнении с контрольными данными, выраженное действие на степень снижения кандид в кишечнике перепелов в сторону физиологических значений. К 60-м и 90-м суткам уровень кандид в кишечнике птиц группы 2 снизился по сравнению с контролем в 1,24 и 1,09 раза соответственно. Более выраженное действие на степень восстановления содержания Candida albicans оказывало применение ЭТГ (группа 3) и ЭП (группа 4). Показатели этих групп к 60-м суткам были ниже, чем в контроле в 1,32 и 1,21 раза, на 90-е сутки — в 1,25 и 1,11 раза.

КПТ перепелов, не подвергнутых лечебным манипуляциям (5 группа), сопровождались активным размножением кандид, прогрессирующим по срокам опыта. Здесь уже к началу опытов их содержание превысило показатель здоровых птиц 1-й группы в 1,88 раза.

Таблица 1. Динамика в толстом отделе кишечника Candida albicans под влиянием БАПП на здоровых и больных КПТ перепелов, lg КОЕ/г

Сроки опыта сут. (возраст)	Статистический показатель	Группы: 1–5 — здоровые, 5–8 — больные КПТ
		1	2	3	4	5	6	7	8
		КЗ	ЭВМ	ЭТГ	ЭП	КПТ	КПТ+ ЭВМ	КПТ+ ЭТГ	КПТ+ ЭП
Фон (10)	М	3,42	3,18	2,74	2,98	6,42	5,18	3,24	4,26
	±m	0,09	0,07	0,30	0,20	0,39	0,41	0,29	0,43
	Cv.%	2,6	2,2	10,9	6,7	6,0	7,9	8,9	10,0
10 (20)	М	3,78	3,46	2,56	3,12	9,14	7,48	4,12	4,92
	±m	0,10	0,10	0,29	0,23	0,46	0,49	0,33	0,34
	Cv.%	2,6	2,8	11,3	7,3	5,0	6,5	8,0	6,9
	P		*	*	**	**	**	***	***
20 (30)	М	3,36	3,24	2,46	2,94	12,8	6,14	5,02	5,76
	±m	0,03	0,05	0,24	0,12	1,89	0,64	0,49	0,38
	Cv.%	0,9	1,5	9,7	4,1	14,7	10,4	9,7	6,6
	P		*	***	**	***	**	***	***
30 (40)	М	3,52	3,00	2,20	3,19	16,2	9,22	6,34	7,10
	±m	0,12	0,11	0,41	0,10	2,11	1,56	1,01	1,12
	Cv.%	3,4	3,6	18,6	3,1	13,0	16,9	15,9	15,7
	P		**	**	*	***	**	***	***
60 (70)	М	2,64	2,12	2,00	2,18	18,6	8,40	5,06	5,96
	±m	0,02	0,05	0,05	0,02	1,32	1,45	0,79	0,89
	Cv.%	0,7	2,4	2,5	0,9	7,0	17,2	15,6	14,9
	P		*	*	*	***	***	***	***
90 (100)	М	2,42	2,02	1,76	1,90	20,20	6,12	4,38	5,08
	±m	0,09	0,11	0,19	0,18	1,31	0,91	0,57	0,28
	Cv.%	3,7	5,4	10,8	9,5	6,5	14,8	13,0	5,5
	P		*	**	**	***	***	***	***

Примечание. * — Р ≥ 0,95; ** — Р ≥ 0,99; *** — Р ≥ 0,999; КЗ — контроль — здоровые; КПТ — кандидамикозы пищеварительного тракта; экстракты: ЭВМ — восковой моли; ЭТГ —трутневого гомогената; ЭП — прополиса

Table 1. Dynamics of Candida albicans in large intestine of healthy and CDT-infected quails under the influence of biologically active bee products, lg CFU/g

Length of experiment, days (age)	Statistic indicator	Groups: 1–5 — healthy, 5–8 — infected with CDT
		1	2	3	4	5	6	7	8
		CH	EWМ	EDH	EP	CDT	CDT + EWМ	CDT + EDH	CDT + EP
Background (10)	М	3.42	3.18	2.74	2.98	6.42	5.18	3.24	4.26
	±m	0.09	0.07	0.30	0.20	0.39	0.41	0.29	0.43
	Cv.%	2.6	2.2	10.9	6.7	6.0	7.9	8.9	10.0
10 (20)	М	3.78	3.46	2.56	3.12	9.14	7.48	4.12	4.92
	±m	0.10	0.10	0.29	0.23	0.46	0.49	0.33	0.34
	Cv.%	2.6	2.8	11.3	7.3	5.0	6.5	8.0	6.9
	P		*	*	**	**	**	***	***
20 (30)	М	3.36	3.24	2.46	2.94	12.8	6.14	5.02	5.76
	±m	0.03	0.05	0.24	0.12	1.89	0.64	0.49	0.38
	Cv.%	0.9	1.5	9.7	4.1	14.7	10.4	9.7	6.6
	P		*	***	**	***	**	***	***
30 (40)	М	3.52	3.00	2.20	3.19	16.2	9.22	6.34	7.10
	±m	0.12	0.11	0.41	0.10	2.11	1.56	1.01	1.12
	Cv.%	3.4	3.6	18.6	3.1	13.0	16.9	15.9	15.7
	P		**	**	*	***	**	***	***
60 (70)	М	2.64	2.12	2.00	2.18	18.6	8.40	5.06	5.96
	±m	0.02	0.05	0.05	0.02	1.32	1.45	0.79	0.89
	Cv.%	0.7	2.4	2.5	0.9	7.0	17.2	15.6	14.9
	P		*	*	*	***	***	***	***
90 (100)	М	2.42	2.02	1.76	1.90	20.20	6.12	4.38	5.08
	±m	0.09	0.11	0.19	0.18	1.31	0.91	0.57	0.28
	Cv.%	3.7	5.4	10.8	9.5	6.5	14.8	13.0	5.5
	P		*	**	**	***	***	***	***

Note. * — Р ≥ 0.95; ** — Р ≥ 0.99; *** — Р ≥ 0.999; CH — control — healthy; CDT — candidiasis of the digestive tract; EWМ — extract of wax moth; EDH — extract of drone homogenate; EP — extract of propolis

На 10, 20, 30, 60, 90-е сутки эта тенденция нарастала и уровень Candida albicans в толстом отделе кишечника птиц 5 группы увеличился, по сравнению с данными контроля, в 2,41; 3,8; 4,6; 7,04 и 8,34 раза. Применение ЭВМ способствовало умеренному уменьшению активности размножения Candida albicans в кишечнике больных перепелов. Их уровень снизился по сравнению с данными птиц группы 5, по 6-й группе, к началу исследований (фон), затем на 10, 20, 30, 60, 90-е сутки — в 1,24; 1,22; 2,08; 1,75; 2,21; 3,3 раза. Более выраженное снижение уровня Candida albicans отмечалось в группе 7 на фоне внесения в рацион больных птиц ЭТГ. На эти сроки опыта уровень Candida albicans в кишечнике птиц 7-й группы был ниже, по сравнению с данными больных, не подвергнутых лечению, птиц 5-й группы, соответственно в 2,21; 2,55; 2,55; 3,67 и 4,61 раза. Незначительно ниже по активности действия на кандид, по сравнению с данными перепелов группы 7, были показатели птиц группы 8, в которой применяли экстракт прополиса. Здесь уровень Candida albicans был ниже, по сравнению с показателями больных птиц 5-й группы на эти же сроки исследований, в 1,87; 2,22; 2,28; 3,12; 3,97 раза. Таким образом применение БАПП способствовало предупреждению и профилактике активизации Candida albicans в организме здоровых перепелов и особенно выраженно — восстановлению их уровня на фоне КПТ.

Активизация Candida albicans в организме здоровых перепелов групп 1–4 и особенно их бурная реакция на фоне развития КПТ у птиц групп 5–8 способствовали нарушению в толстом отделе кишечника перепелов баланса нормофлоры: лактобацилл и бифидобактерий.

Прослежена динамика изменения содержания Lactobacillus spр. в толстом отделе кишечника перепелов под влиянием разных БАПП на рис. 1. Содержание Lactobacillus spр. в толстом отделе кишечника птиц 1-й контрольной группы до 30 сут. опыта не имело заметных колебаний в возрастном аспекте. Все исследованные БАПП в разной степени активности способствовали повышению уровня Lactobacillus spр. в толстом отделе кишечнике здоровых перепелов.

Рис. 1. Динамика в толстом отделе кишечника Lactobacillus spp. под влиянием БАПП на здоровых (а) и зараженных КПТ (б) перепелов, lg КОЕ/г
Источник: сделано авторами

Fig. 1. Dynamics of Lactobacillus spp. in large intestine of healthy (a) and CDT-infected (б) quails under the influence of BABP, lg CFU/g
Source: created by the authors

На фоне применения ЭВМ уровень лактобацилл увеличился в кишечнике перепелов 2-й группы, по сравнению с его значением у птиц 1-й контрольной группы, к 10, 20, 30, 60 и 90 сут. — в 1,06; 1,29; 1,34; 1,81; 1,74 раза.

Самого высокого значения уровень лактофлоры достиг в толстом отделе кишечника перепелов 3-й группы, в которой в состав рациона добавляли ЭТГ. Разница в сторону превышения (см. рис. 1, б), в сравнении с контрольными показателями, составила на 10, 20, 30, 60 и 90-е сутки опыта в 1,16; 1,5; 1,57; 2,28 и 2,07 раза (на 16,2; 50,0; 57,5; 128,9; 107, 6 %).

Незначительно ниже, по степени активности, усиление размножения в толстом отделе кишечника Lactobacillus spр. проявлялось под действием прополиса (4-я группа). В этой группе уровень лактобацилл увеличился, по сравнению с показателями птиц 1-й контрольной группы, на эти сроки опыта — в 1,05; 1,44; 1,48; 2,07 и 1,92 (на 5,4; 44,4; 48,7; 107,2: 92,3 %).

На фоне развития КПТ в толстом отделе кишечника перепелов нарушался баланс лактобацилл, развивались вторичные дисбактериозы (см. рис. 1, б). Уровень Lactobacillus spр. был снижен, по сравнению с показателями здоровых птиц 1-й контрольной группы, к началу опытов (фон) в 1,56 раза. В последующие сроки исследований этот процесс прогрессировал, что было связано с активизацией кандид в кишечнике и нарушением баланса между нормофлорой и условно- патогенными микроорганизмами. На 10, 20, 30, 60 и 90-е сутки уровень Lactobacillus spр. в кишечнике перепелов 5 группы уступал показателям птиц 1-й контрольной группы в 1,94; 3,6; 5,71; 4,31 и 6,0 раз. При этом внесение БАПП в рацион перепелов опытных групп 6, 7 и 8 способствовало активизации размножения лактобацилл в кишечнике птиц, параллельно с их активным снижением в кишечнике больных и не леченных птиц 5-й группы.

Уровень Lactobacillus spр. в кишечнике перепелов 6-й группы под влиянием ЭВМ уже к началу опыта имел тенденцию к повышению — 1,11 раза. В последующие сроки опыта (10, 20, 30, 60 и 90 сут.) этот процесс нарастал, по сравнению с контрольным уровнем больных птиц 5-й группы — в 1,47; 3,95; 6,00; 5,75 и 6,38 раза. Более активное увеличение содержания в кишечнике лактофлоры отмечалось на фоне применения ЭТГ (7-я группа) — в 1,92; 4,75; 7,64; 7,75; 10,0 раз. Показателям перепелов 7-й группы незначительно уступали данные птиц 8-й группы, в которой использовали БАПП — прополис. Здесь на те же сроки опыта уровень Lactobacillus spр. увеличился в 1,81; 4,35; 7,00; 6,87 и 8,84 раза.

Подобным образом в кишечнике перепелов изменялась динамика содержания бифидобактерий (табл. 2), которые у птиц 1-й контрольной группы за период опытов выделялись на уровне от 8,0 до 11,6 lg КОЕ/г, увеличиваясь в возрастном аспекте, что связано с физиологическим становлением микробиоценоза кишечника. Но значения этих показателей по всему периоду опытов в данной группе были несколько занижены. Применение БАПП способствовало, в разной степени активности, проявлению скрытых физиологических возможностей организма перепелов по восстановлению бифидофлоры.

Таблица 2. Динамика Bifidobacterium spp. в толстом отделе кишечника здоровых и больных КПТ перепелов под влиянием БАПП, lg КОЕ/г

Сроки опыта, сут. (возраст)	Стат. показатель	Группы: 1–5 — здоровые, 5–8 — больные КПТ
		1	2	3	4	5	6	7	8
		КЗ	ЭВМ	ЭТГ	ЭП	КПТ	КПТ+ ЭВМ	КПТ+ ЭТГ	КПТ+ ЭП
Фон (10)	М	8,0	10,0	12,0	11,2	6,0	7,05	9,60	8,10
	±m	0,12	0,41	0,35	0,22	0,35	0,22	0,57	0,65
	Cv.%	1,5	4,1	4,1	1,9	5,8	3,1	5,9	8,0
10 (20)	М	9,2	11,4	14,4	13,0	5,2	9,44	12,80	11,30
	±m	0,45	0,30	0,65	0,60	0,22	1,22	1,78	0,97
	Cv.%	4,8	2,6	4,5	4,6	4,2	12,9	13,9	8,6
	P		***	***	***	***	**	***	***
20 (30)	М	8,7	12,7	16,3	14,9	3,4	9,92	13,28	12,42
	±m	0,45	0,44	0,75	0,75	0,12	0,86	0,77	1,21
	Cv.%	5,2	3,4	4,6	5,0	3,5	8,6	5,8	9,7
	P		***	***	***	***	***	***	***
30 (40)	М	9,9	13,6	18,0	16,3	2,7	8,50	14,00	12,7
	±m	0,65	0,60	0,73	0,45	0,30	0,76	1,86	1,09
	Cv.%	6,5	4,4	4,0	2,7	11,1	8,9	13,3	8,6
	P		***	***	***	***	***	***	***
60 (70)	М	10,4	14,9	21,3	18,7	1,9	10,2	16,0	14,4
	±m	0,30	0,55	0,80	0,73	0,25	1,03	1,86	0,98
	Cv.%	2,8	3,7	3,7	3,9	13,1	10,1	11,6	6,8
	P		***	***	***	***	***	***	***
90 (100)	М	11,6	16,4	20,8	18,9	1,6	7,26	13,3	10,9
	±m	0,40	0,65	0,60	0,83	0,20	0,67	0,97	0,84
	Cv.%	3,5	3,9	2,9	4,4	12,5	9,2	7,3	7,7
	P		***	***	***	***	***	***	***

Примечание. * — Р ≥ 0,95; ** — Р ≥ 0,99; *** — Р ≥ 0,999; КЗ — контроль — здоровые; КПТ — кандидамикозы пищеварительного тракта; экстракты: ЭВМ — восковой моли; ЭТГ —трутневого гомогената; ЭП — прополиса.

Table 2. Dynamics of Bifidobacterium spp. in large intestine of healthy and CDT-infected quails under the influence of biologically active bee products, lg CFU/g

Length of experiment, days (age)	Statistic indicator	Groups: 1–5 — healthy, 5–8 — infected with CDT
		1	2	3	4	5	6	7	8
		CH	EWМ	EDH	EP	CDT	CDT + EWМ	CDT + EDH	CDT + EP
Background (10)	М	8.0	10.0	12.0	11.2	6.0	7.05	9.60	8.10
	±m	0.12	0.41	0.35	0.22	0.35	0.22	0.57	0.65
	Cv.%	1.5	4.1	4.1	1.9	5.8	3.1	5.9	8.0
10 (20)	М	9.2	11.4	14.4	13.0	5.2	9.44	12.80	11.30
	±m	0.45	0.30	0.65	0.60	0.22	1.22	1.78	0.97
	Cv.%	4.8	2.6	4.5	4.6	4.2	12.9	13.9	8.6
	P		***	***	***	***	**	***	***
		CH	EWМ	EDH	EP	CDT	CDT + EWМ	CDT + EDH	CDT + EP
20 (30)	М	8.7	12.7	16.3	14.9	3.4	9.92	13.28	12.42
	±m	0.45	0.44	0.75	0.75	0.12	0.86	0.77	1.21
	Cv.%	5.2	3.4	4.6	5.0	3.5	8.6	5.8	9.7
	P		***	***	***	***	***	***	***
30 (40)	М	9.9	13.6	18.0	16.3	2.7	8.50	14.00	12.7
	±m	0.65	0.60	0.73	0.45	0.30	0.76	1.86	1.09
	Cv.%	6.5	4.4	4.0	2.7	11.1	8.9	13.3	8.6
	P		***	***	***	***	***	***	***
60 (70)	М	10.4	14.9	21.3	18.7	1.9	10.2	16.0	14.4
	±m	0.30	0.55	0.80	0.73	0.25	1.03	1.86	0.98
	Cv.%	2.8	3.7	3.7	3.9	13.1	10.1	11.6	6.8
	P		***	***	***	***	***	***	***
90 (100)	М	11.6	16.4	20.8	18.9	1.6	7.26	13.3	10.9
	±m	0.40	0.65	0.60	0.83	0.20	0.67	0.97	0.84
	Cv.%	3.5	3.9	2.9	4.4	12.5	9.2	7.3	7.7
	P		***	***	***	***	***	***	***

Note. * — Р ≥ 0.95; ** — Р ≥ 0.99; *** — Р ≥ 0.999; CH — control — healthy; CDT — candidiasis of the digestive tract; EWМ — extract of wax moth; EDH — extract of drone homogenate; EP — extract of propolis.

Разница в содержании бифидофлоры в толстом отделе кишечника птиц групп 2–4 и 1-й контрольной проявлялась уже в фоновом показателе. Выраженные изменения в сторону повышения уровня Bifidobacterium spp. в кишечнике перепелов начинались с 10-х суток опыта — в 1,22; 1,56; 1,41 раза. В последующие сроки опыта процесс активизации бифидофлоры по группам и по срокам исследований продолжался и достиг своего максимума к 60-м суткам исследований — в 1,43; 2,05 и 1,79 раза. К 90-м суткам опыта этот процесс затормозился, что было связано с физиологической стабилизацией их содержания в возрастном аспекте. В целом применение исследованных БАПП для здоровых перепелов играло значительную роль в становлении и формировании содержания Bifidobacterium spp. в толстом отделе кишечника птиц.

Кандидамикозы пищеварительного тракта значительно нарушили баланс бифидобактерий в толстом отделе кишечника. У больных КПТ и не леченных перепелов 5-й группы, по срокам исследований, отмечалось значительное затормаживание активности размножения бифидофлоры в толстом отделе кишечника. Этот процесс прогрессировал по срокам исследований и к 10, 20, 30, 60 и 90-м суткам содержание Bifidobacterium spp. в кишечнике птиц 5-й группы было ниже, чем у перепелов 1-й группы в 1,76; 2,55; 3,66; 5,47; 7,25 раза соответственно. Это свидетельствовало о полном нарушении баланса бифидобактерий в толстом отделе кишечника перепелов на фоне развития КПТ [15].

Применение в группах 6, 7 и 8 БАПП на фоне развития КПТ у перепелов способствовало значительному восстановлению баланса бифидофлоры на фоне активизации Candida albicans в организме птиц. На 10-е сутки от начала исследований уровень Bifidobacterium spp. в толстом отделе кишечника перепелов групп 6, 7 и 8 превысил показатель больных КПТ птиц 5-й группы в 1,81; 2,46; 2,21 раза, на 20-е сутки — 2,91; 3,9; 3,65 раза, на 30-е — в 3,86; 5,18 и 4,7 раза, на 60-е — в 5,36; 8,42 и 7,5 раза, на 90-е — в 4,53; 8,31 и 6,81 раза. В целом все исследованные БАПП оказывали существенное позитивное влияние на восстановление бифидофлоры в толстом отделе кишечника перепелов.

Изменение в толстом отделе кишечника перепелов баланса Candida albicans, Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp. сопровождалось изменением соотношения и других условно- патогенных микроорганизмов: Staphylococcus aureus, Pseudomonas spp.

Исследована динамика содержания Staphylococcus aureus в толстом отделе кишечника перепелов (рис. 2).

Рис. 2. Динамика в толстом отделе кишечника Staphylococcus aureus  под влиянием БАПП на здоровых (а) и больных КПТ (б) перепелов, lg КОЕ/г
Источник: сделано авторами

Fig. 2. Dynamics of Staphylococcus aureus in large intestine of healthy (a) and CDT-infected (б)  quails under the influence of BABP, lg CFU/g
Source: created by the authors

У птиц 1-й контрольной группы содержание Staphylococcus aureus в толстом отделе кишечника было несколько повышенным и выделялось на уровне от 4,1 до 4,9 lg КОЕ/г. При этом не сохранялся баланс остальных, наиболее значимых микроорганизмов, участвующих в микробиоте кишечника. В этой связи изучение микробиоценоза кишечника перепелов очень актуально, так как от него зависит колонизационная резистентность, которая в свою очередь оказывает влияние на резистентность и иммунный статус всего организма. Использование адаптогенов в виде БАПП способствовало быстрому восстановлению баланса кишечной микрофлоры, в т. ч. и Staphylococcus aureus.

Уровень Staphylococcus aureus в кишечнике перепелов групп 2, 3, 4 по срокам опыта под влиянием БАПП постепенно снижался в сторону физиологических значений. К 10-м суткам опыта содержание стафилококков в кишечнике птиц групп 2, 3, 4 снизилось, по сравнению с контрольным показателем, в 1,1; 1,24 и 1,17 раза. Этот процесс активно продолжался и на 20-е сутки разница в сторону уменьшения количества стафилококков составила в 1,37; 1,65 и 1,5; на 30-е сутки — в 1,45; 2,14 и 1,6; на 60-е — в 1,63; 2,58 и 1,91 раза. Максимального значения данный процесс достиг на 90-е сутки исследований. Здесь уровень Staphylococcus aureus в кишечнике перепелов 2-й группы снизился в 3,5 раза, в кишечнике птиц групп 3 и 4 Staphylococcus aureus не выделялся.

Значительно активизировалось размножение Staphylococcus aureus в толстом отделе кишечника птиц на фоне развития КПТ. Фоновый уровень Staphylococcus aureus в кишечнике птиц 5-й группы превысил контрольный показатель птиц 1-й группы в 1,54 раза. Процесс активизации Staphylococcus aureus в кишечнике птиц 5-й группы прогрессировал по срокам исследований и на 10, 20, 30, 60 и 90-е сутки опыта был выше контрольного значения в 2,0; 2,16; 2,64; 3,09 и 11,6 раза соответственно.

Все исследованные БАПП способствовали восстановлению в толстом отделе кишечника больных птиц уровня Staphylococcus aureus. В кишечнике перепелов групп 6, 7 и 8 содержание Staphylococcus aureus снизилось, по сравнению с показателями птиц 5 группы, на 10-е и 20-е сутки исследований в 1,34 и 2,12; в 1,6 и 2,81; 1,46 и 2,47 раза. В последующие сроки исследований уровень Staphylococcus aureus в этих группах имел тенденцию к более интенсивному снижению: на 30-е сутки опыта в 2,83: 3,84 и 3,5 раза, на 60-е — 3,48; 5,15 и 4,79 раза, к концу опыта (90-е сутки) — 4,0; 7, 78 и 4,5 раза. При этом более выраженную биологическую активность проявлял ЭТГ, незначительно уступал ему по активности ЭП и несколько ниже было действие на Staphylococcus aureus ЭВМ. Подобным образом изменялась в кишечнике перепелов динамика содержания Pseudomonas spp. (рис. 3).

Следовательно, все изученные БАПП (ЭВМ, ЭТГ и ЭП) способствуют стабилизации у перепелов, разводимых в неволе, генетически заложенных механизмов естественного микробиоценоза кишечника без нанесения ущерба для самого организма восстановлением содержания и баланса нормофлоры и условно-п атогенных микроорганизмов.

Рис. 3. Динамика в толстом отделе кишечника Pseudomonas spp. под влиянием БАПП на здоровых (а) и больных (б) КПТ перепелов, lg КОЕ/г
Источник: сделано авторами

Fig. 3. Dynamics of Pseudomonas spp. in large intestine of healthy (a) and CDT-infected (б) quails under the influence of BABP, lg CFU/g
Source: created by the authors

Комплекс стрессирующих факторов, встречаемых при разведении перепелов, приводит к значительной активизации Candida albicans в толстом отделе кишечника птиц с последующим развитием КПТ, глубоких дисбактериозов, проявляющихся нарушением баланса нормофлоры и условно-п атогенных микроорганизмов, завершающихся летальным исходом молодняка.

Заключение

1. КПТ вызывают развитие в кишечнике перепелов дисбактериозов, характеризующихся:

• повышением активности размножения условно-п атогенных микроорганизмов: Candida albicans — в 8,34 раза, Staphylococcus aureus — в 4,37 раза, Pseudomonas spp. — в 3,29 раза;
• затормаживанием размножения и снижением уровня нормофлоры: Lactоbacillus spр. — в 6,0 раз, Bifidobacterium spp. — в 7,25 раза.

2. Для восстановления колонизационной резистентности больных КПТ перепелов хорошим профилактическим и терапевтическим эффектом обладают БАПП: ЭВМ, ЭТГ и ЭП, которые способствуют в толстом отделе кишечника:

• снижению уровня условно-п атогенных Candida albicans — в 3,3; 4,61 и 3,97 раза; Staphylococcus aureus — в 4,0; 7,78 и 4,5 раза; Pseudomonas spp. — в 3,05; 5,32 и 3,96 раза;
• активизации и повышению содержания нормофлоры: Lactobacillus spр. — в 6,38; 10,0 и 8,84 раза, Bifidobacterium spp. — в 5,36; 8,42 и 7,5 раза.

Об авторах

Рустем Раисович Шайхулов

Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А Тимирязева

Email: provimirb@mail.ru
ORCID iD: 0009-0001-6085-0811
SPIN-код: 6001-3210

кандидат биологических наук, докторант кафедр микробиологии и иммунологии, аквакультуры и пчеловодства

Российская Федерация, 127434, г. Москва, ул. Тимирязевская, д. 49

Рамзия Тимергалеевна Маннапова

Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А Тимирязева

Автор, ответственный за переписку.
Email: ram.mannapova55@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9092-9862
SPIN-код: 8353-2001

доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры микробиологии и иммунологии

Российская Федерация, 127434, г. Москва, ул. Тимирязевская, д. 49

Дмитрий Валерьевич Свистунов

Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А Тимирязева

Email: svist.ru@mail.ru
ORCID iD: 0009-0008-4277-9709
SPIN-код: 4250-7506

аспирант кафедр микробиологии и иммунологии, аквакультуры и пчеловодства

Российская Федерация, 127434, г. Москва, ул. Тимирязевская, д. 49

Список литературы

Дополнительные файлы